| Resumen | Las limitaciones que presentan los anticuerpos monoclonales de ratón para su uso en la radioinmunoterapia han estimulado la búsqueda de moléculas más pequeñas derivadas de los mismos, que generalmente presentan una mayor permeabilidad a los tejidos, menor tiempo de vida media en sangre y menor inmunogenicidad. Una de las múltiples variantes que se estudian actualmente para lograr este propósito son los fragmentos de anticuerpos en su conformación dimérica, los que por sus caracterÃsticas pueden satisfacer las expectativas anteriores, y además mantienen la afinidad funcional del anticuerpo monoclonal original al recrear los dos sitios de unión al antÃgeno. En el presente trabajo se describe la obtención de un fragmento de anticuerpo dimérico, denominado fragmento anti-CEA M3, con el cual se pretende superar las limitaciones de biodistribución y inmunogenicidad que presenta el anticuerpo monoclonal de ratón CB/iorCEA.1 para su empleo en la radioinmunoterapia del cáncer. El fragmento de este anticuerpo se construyó mediante la unión de las regiones variables de cadena pesada y ligera con un péptido de 5 aminoácidos. El fragmento anti-CEA M3 se expresó de forma activa en el periplasma de E. coli y se purificó mediante cromatografÃas de afinidad a iones metálicos y de exclusión molecular, lográndose establecer un proceso de producción a escala de 5 Litros de fermentación con un rendimiento final de 3 mg/L de fragmento dimérico. La especificidad de este fragmento por su antÃgeno se evaluó por ELISA, inmunofluorescencia y itometrÃa de flujo, mientras la afinidad se determinó en un ELISA de competencia y en el BIAcore. El fragmento anti-CEA M3 se logró marcar con alta eficiencia a los isótopos radioactivos 125 I y 131 I a través del método de la cloramina T, alcanzándose elevada estabilidad durante los marcajes. La molécula adiomarcada mantuvo la inmunorreactividad y afinidad por el CEA similar al anticuerpo completo. Experimentos en ratones atÃmicos xenotransplantados concélulas tumorales humanas LS 174T demostraron una acumulación especÃfica de este fragmento en el tumor y una baja acumulación en el resto de los tejidos. Los primeros resultados obtenidos en el marco de un ensayo clÃnico fase I con el fragmento anti-CEA radiomarcado con 131 I en pacientes con cáncer colorectal indicaron que el fragmento no produce eventos adversos y no origina inmunogenicidad 1 mes después de la administración. Durante las imágenes gammagráficas se demostró que no se acumula inespecÃficamente en los órganos no blancos mientras ocurre una acumulación especÃfica en el tumor. Estos resultados sugieren las posibles ventajas del fragmento sobre el anticuerpo original al usarse en la radioinmunoterapia del cáncer. |
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| Institución donde se realiza | Universidad de La Habana. Facultad de BiologÃa |
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| Año de defensa de la tesis |
| Tutor 1 | Ayala Avila, Marta |
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| Tutor 2 | Pimentel, Gilmara |
| Versión de tesis |
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| Materia |
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| Lista de descriptores | |
| Número de la resolución | 3/2009 |
| Año resolución | |
| Texto Completo |
| Modificado el | 2023-06-28 11:24:27 |
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| Fecha creación | 2023-06-28 11:24:27 |
| Fecha de publicación | 2023-06-28 11:24:27 |
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