Evaluación de la eficiencia de biomodelos murinos en los ensayos de genotoxicidad y antigenotoxicida

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Arencibia Arrebola, Daniel Francisco

Resumen	En Cuba no existen publicados valores de referencia de los índices de daños espontáneos e inducidos determinados en los diferentes ensayos de genotoxicidad in vivo , que sirvan como punto de comparación entre los diferentes productos que se investigan y los de referencia. Además, se desconoce la eficiencia íntrinseca de una especie o línea en particular para detectar sustancias con bajo potencial genotóxico, lo cual al sugerir el uso específico de una de ellas, le otorgaría a los ensayos de genotoxicidad mayor sensibilidad, especificidad metodológica y robustez. Por otro parte, en ensayos de antigenotoxicidad in vivo, no se establecen posibles diseños experimentales armonizados que tengan en cuenta la dosis, vía, tipo de mutágeno a utilizar y el número de exposiciones; siendo estos aspectos necesarios en el establecimiento de guías regulatorias para este tipo de ensayos. En esta investigación se establecieron los rangos de daño al ADN espontáneos e inducidos con ciclofosfamida (CF) mediante ensayos citogenéticos en ratones de las líneas BALB/c, NMRI, OF-1 y C57BL/6 y ratas de las líneas Sprague Dawley (SD), Lewis y Wistar. Además, se comparó la eficiencia de diferentes biomodelos murinos que se desarrollan y comercializan en Cuba en ensayos de genotoxicidad, teniendo en cuenta los resultados de daño al ADN, mediante el ensayo cometa alcalino de leucocitos de sangre periférica, micronúcleos y aberraciones cromosómicas de células de la médula ósea y la morfología de la cabeza del espermatozoide. La línea de ratón y de rata más sensible se evaluó como biomodelo en ensayos de antigenotoxicidad, utilizando dos mutágenos con administraciones en tiempos diferentes. Para determinar el nivel de aplicabilidad de estos resultados se utilizó la línea más sensible al evaluar el efecto genotóxico in vivo de un extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet administrado por vía oral. Se concluye, que la especie murina más sensible son los ratones BALB/c, con excepción en el ensayo cometa donde la especie más sensible son las ratas SD. El mejor diseño para ensayos in vivo de antigenotoxicidad, tanto en ratas SD como en ratones BALB/c, fue la administración de CF en dos ocasiones con intervalos de 24 horas entre ambas administraciones, por vía intraperitoneal en dosis de 50 mg/kg y por último al utilizar la línea más sensible, se demostró que el extracto oleoso evaluado no posee efecto genotóxico in vivo a diferentes niveles de daño al ADN, sin embargo al administrarse durante 35 días por vía oral (2 000 mg/kg) fue citotóxico en células germinales de ratones BALB/c machos.
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Resumen

En Cuba no existen publicados valores de referencia de los índices de daños espontáneos e inducidos determinados en los diferentes ensayos de genotoxicidad in vivo , que sirvan como punto de comparación entre los diferentes productos que se investigan y los de referencia. Además, se desconoce la eficiencia íntrinseca de una especie o línea en particular para detectar sustancias con bajo potencial genotóxico, lo cual al sugerir el uso específico de una de ellas, le otorgaría a los ensayos de genotoxicidad mayor sensibilidad, especificidad metodológica y robustez. Por otro parte, en ensayos de antigenotoxicidad in vivo, no se establecen posibles diseños experimentales armonizados que tengan en cuenta la dosis, vía, tipo de mutágeno a utilizar y el número de exposiciones; siendo estos aspectos necesarios en el establecimiento de guías regulatorias para este tipo de ensayos. En esta investigación se establecieron los rangos de daño al ADN espontáneos e inducidos con ciclofosfamida (CF) mediante ensayos citogenéticos en ratones de las líneas BALB/c, NMRI, OF-1 y C57BL/6 y ratas de las líneas Sprague Dawley (SD), Lewis y Wistar. Además, se comparó la eficiencia de diferentes biomodelos murinos que se desarrollan y comercializan en Cuba en ensayos de genotoxicidad, teniendo en cuenta los resultados de daño al ADN, mediante el ensayo cometa alcalino de leucocitos de sangre periférica, micronúcleos y aberraciones cromosómicas de células de la médula ósea y la morfología de la cabeza del espermatozoide. La línea de ratón y de rata más sensible se evaluó como biomodelo en ensayos de antigenotoxicidad, utilizando dos mutágenos con administraciones en tiempos diferentes. Para determinar el nivel de aplicabilidad de estos resultados se utilizó la línea más sensible al evaluar el efecto genotóxico in vivo de un extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet administrado por vía oral. Se concluye, que la especie murina más sensible son los ratones BALB/c, con excepción en el ensayo cometa donde la especie más sensible son las ratas SD. El mejor diseño para ensayos in vivo de antigenotoxicidad, tanto en ratas SD como en ratones BALB/c, fue la administración de CF en dos ocasiones con intervalos de 24 horas entre ambas administraciones, por vía intraperitoneal en dosis de 50 mg/kg y por último al utilizar la línea más sensible, se demostró que el extracto oleoso evaluado no posee efecto genotóxico in vivo a diferentes niveles de daño al ADN, sin embargo al administrarse durante 35 días por vía oral (2 000 mg/kg) fue citotóxico en células germinales de ratones BALB/c machos.

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Institución donde se realiza	Universidad de Ciencias Médicas de La Habana

Tipo de tesis	Doctor en Ciencias Doctor en Ciencias de una Especialidad
Provincia	La Habana
Año de defensa de la tesis	2014

Tutor 1	Vidal Novoa, Alexis
Tutor 2	Suarez Fernández, Yolanda Emilia

Versión de tesis	No publicado

Materia	Compuestos Químicos y Drogas -- Compuestos Orgánicos Compuestos Químicos y Drogas -- Preparaciones de Plantas Disciplinas y Ocupaciones -- Bioquímica Salud Pública -- Salud Ambiental Fenómenos y Procesos -- Fenómenos Genéticos Técnicas Analíticas, Diagnósticas y Terapéuticas y Equipos -- Pruebas de Toxicidad
Lista de descriptores	Animales de Laboratorio Cuba Extractos Vegetales/toxicidad Ciclofosfamida/toxicidad Pruebas de Toxicidad
Número de la resolución	5/2015
Año resolución	2015
Texto Completo	Público

Modificado el	2023-06-27 21:50:16
Fecha creación	2023-06-27 21:50:16
Fecha de publicación	2023-06-27 21:50:16

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Repositorio de Tesis en Ciencias Biomédicas y de la Salud de Cuba

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