| Resumen | El diagnóstico precoz del infarto agudo del miocardio (IAM), patología que constituye una de las causas principales de muerte a nivel mundial, es fundamental para la aplicación temprana de una terapia que puede salvar la vida del paciente. En las primeras 0.5-2 horas de aparición de los síntomas clínicos, y antes de que sean detectables otros indicadores séricos, los niveles de mioglobina (Mb) se elevan, constituyendo uno de los indicadores más precoces de la necrosis miocárdica. Dada la carencia en Cuba de un diagnosticador de este tipo, los Laboratorios de Investigación de la EPB “Carlos J. Finlay” y de Inmunología de la Facultad de Biología se dieron a la tarea de desarrollar un reactivo de látex-aglutinación en lámina para mioglobina, que brindara una respuesta rápida (2-3 minutos) y de fácil ejecución, para ser aplicado en el nivel primario de salud. Los problemas principales a enfrentar fueron: el trabajo con el músculo humano, la baja inmunogenicidad de la mioglobina y sus posibles relaciones o asociaciones con la hemoglobina (Hb). Estos inconvenientes fueron resueltos en buena medida con el empleo de la Mb equina, en base a sus similitudes antigénicas con la Mb humana. El trabajo se desarrolló en dos etapas. La primera, de investigación básica, incluyó la purificación y caracterización de la Mb humana y sus anticuerpos específicos, y la segunda etapa, la adecuación a la práctica productiva de los resultados obtenidos a escala de laboratorio, así como la evaluación de la efectividad del reactivo en el terreno. Los resultados más importantes de la primera etapa fueron: (1) El desarrollo de un método de purificación de Mb humana consistente en cromatografía de exclusión molecular en Superose 12 e intercambio aniónico en Mono Q con empleo del sistema FPLC, el cual rindió Mb de pureza elevada. (2) Un método para la obtención de anticuerpos policlonales anti-Mb humana en carnero con empleo de un conjugado Mb humana-hemocianina que alcanzó títulos 1/6,400 por ELISA. (3) Un método de inmunoabsorción simple para la purificación de los anticuerpos, con Mb equina polimerizada con glutaraldehído, que permitió la recuperación de unos 300 mg de anticuerpos por mL de antisuero y eliminó su reactividad frente a la hemoglobina (Hb) humana, además de facilitar la reacción de aglutinación. Los resultados más sobresalientes de la segunda etapa fueron: (1) La propuesta de un flujo tecnológico, a partir del ajuste de los resultados obtenidos en la primera etapa, que rinde por mL de antisuero hasta 500 mg de anticuerpos purificados para el recubrimiento de las partículas, y la preparación del juego de reactivos de látex-aglutinación, nombrado MIOLÁTEX. (2) La evaluación del reactivo en el terreno con muestras de suero de 85 pacientes que acudieron al centro hospitalario con síntomas de IAM, la cual evidenció buena correspondencia entre los resultados del MIOLÁTEX y el diagnóstico final. El reactivo demostró contar con la sensibilidad, especificidad y valores predictivos requeridos para este tipo de diagnosticador y resultó útil para descartar el infarto de miocardio a las 6 horas de la admisión, además de contribuir a su diagnóstico, al monitoreo de la reperfusión y a la detección de reinfarto. |
|---|---|
| Institución donde se realiza | Universidad de La Habana. Facultad de Biología |
|---|
| Tipo de tesis | |
|---|---|
| Provincia | |
| Año de defensa de la tesis |
| Tutor 1 | Álvarez Marcer, Mario |
|---|
| Versión de tesis | |
|---|---|
| Departamento | Facultad de Biología |
| Materia | |
|---|---|
| Lista de descriptores | |
| Número de la resolución | 11/2009 |
| Año resolución | |
| Texto Completo |
| Modificado el | 2023-07-02 20:39:06 |
|---|---|
| Fecha creación | 2023-07-02 20:39:06 |
| Fecha de publicación | 2023-07-02 20:39:06 |
Crear cuenta