Con el propósito de diseñar una propuesta que permita la identificación de las principales entidades taxonómicas de Leishmania en diversas áreas geográficas, se investigó el gen que codifica la proteína de choque térmico de 70kDa. Se detectaron mediante PCR 16 especies de importancia médica de este parásito, de las cuales 9 se estudian por primera vez con relación a este gen. Se obtuvieron y caracterizaron 44 secuencias nucleotídicas hsp70, y se realizó un análisis filogenético que constituyó un marco de referencia para la posterior discriminación. Se identificaron y seleccionaron los sitios polimórficos individuales más apropiados para facilitar la tipificación de la mayoría de las especies o entidades taxonómicas de importancia médica de Leishmania, para el Nuevo y el Viejo Mundo, mediante digestiones enzimáticas sucesivas del producto de PCR. Se diseñó un algoritmo teórico de tipificación que se corroboró a través del análisis de cepas de referencia y muestras biológicas de origen diverso, que permitió proponer la PCR-hsp70/RFLP, como herramienta para la identificación universal de Leishmania, lo cual resulta novedoso y de gran aplicación en países endémicos, centros de referencia o investigación y clínicas del viajero.