La vacunación con el Bacilo Calmette-Guérin (BCG) protege solo contra la tuberculosis grave de la infancia, lo cual plantea un reto en la búsqueda de alternativas profilácticas. Teniendo en cuenta el antecedente protector de Mycobacterium habana contra la tuberculosis experimental y la posibilidad de contar en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis, Lepra y Micobacterias, del "Instituto Ì?Pedro Kourí"(IPK), con una colección autóctona de esta micobacteria, nos propusimos determinar la virulencia, inmunogenicidad y protección, de tres cepas de M. habana como candidato vacunal contra la tuberculosis. La infección intratraqueal de ratones, con M. habana TMC 5135 e IPK-337 permitió un 100% de sobrevida, escasos daños pulmonares y la expresión de factores inmunoprotectores contra M.tuberculosis. En cambio, M.habana IPK-220 mostró una menor atenuación, y se descartó del experimento de vacunación. Las cepas IPK-337 y TMC 5135 manifestaron ser más inmunogénicas que BCG, en respuesta a antígenos relevantes de M tuberculosis e iguales de seguras que esta, cuando se aplicaron en un modelo animal inmunodeficiente, resultados que permitieron continuar hacia el experimento de protección. La vacunación con M. habana TMC 5135 impidió la progresión a enfermedad, luego del reto con M. tuberculosis, en niveles similares a BCG. Estos resultados garantizan la continuidad de este candidato hacia etapas posteriores del desarrollo preclínico.